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敲除細胞株構建

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　　Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats（CRISPR）/Cas9是細菌和古細菌在長期進化而形成的一種適應性免疫防御機制，CRISPR/Cas9系統可以用于各種基因組的編輯。CRISPR/Cas9系統會通過小導向RNA(sgRNA)對切割區域進行識別，并利用Cas9內切酶實現在識別位點中間預測的位置切割，造成DNA雙鏈斷裂，在細胞進行易錯修復后造成隨機的突變。CRISPR/Cas9系統其突變效率高、靈活簡單，周期短，成本低，已經被廣泛的應用于基因編輯的研究。CRISPR/Cas9系統應用的領域是基因敲除株系構建和基因敲除動物的研究。

　　公司可提供項目服務包括：CRISPR/Cas9實驗方案設計、CRISPR/Cas9基因敲除載體構建、CRISPR/Cas9基因敲除載體病毒包裝、CRISPR/Cas9基因敲除細胞株構建

服務特點：

1 定制特定基因敲除細胞系只需提供基因名稱；
2 快速獲得有效sgRNA，基因編輯效率高；
3 實驗周期短；
4 可根據需要提供CRISPR/Cas9慢病毒包裝服務

操作流程

1 靶向目的序列sgRNA的設計、載體構建及活性驗證
2 目的細胞系共轉染，初步篩選混合克隆
3 鋪單克隆，單克隆篩選及鑒定細胞基因型
4 陽性細胞株的擴增